Блог

Jul 22, 2023

Адресная доставка ПД

BMC Medicine Volume 21, Номер статьи: 327 (2023) Ссылаться на эту статью 231 Доступ 1 Подробности Altmetric Metrics CD133 считается маркером раковых стволовых клеток (CSC) в нескольких типах опухолей,

BMC Medicine том 21, Номер статьи: 327 (2023) Цитировать эту статью

231 Доступов

1 Альтметрика

Подробности о метриках

CD133 считается маркером раковых стволовых клеток (РСК) при нескольких типах опухолей, включая гепатоцеллюлярную карциному (ГЦК). Т-клетки, специфичные для химерного антигенного рецептора (CAR-T), нацеленные на CD133-положительные РСК, появились в качестве инструмента для клинического лечения ГЦК, но иммуногенность, высокая стоимость рекомбинантных вирусных векторов клинического уровня и потенциальный инсерционный мутагенез ограничивают их клиническое применение. .

CD133-специфичные CAR-T-клетки, секретирующие PD-1, блокирующие scFv (CD133 CAR-T и PD-1 s-клетки), были сконструированы с использованием транспозонной системы «Спящая красавица» по технологии мини-кольца и противоопухолевой эффективности CD133 CAR-T и PD-1. s-клетки анализировали in vitro и in vivo.

Однофакторный анализ показал, что экспрессия CD133 у пациентов мужского пола на поздней стадии (II и III) была значимо связана с худшей выживаемостью без прогрессирования (ВБП) (P = 0,0057) и общей выживаемостью (ОВ) (P = 0,015), а многомерный анализ показал тенденцию к ухудшению ОВ (P = 0,041). Пациенты мужского пола с распространенным ГЦК имели примерно в 20 раз более высокий комбинированный положительный балл (CPS) PD-L1 по сравнению с пациентами с ГЦК на ранней стадии. Мы успешно создали клетки CD133 CAR-T и PD-1, которые могли бы секретировать scFv, блокирующий PD-1, на основе системы «спящей красавицы», включающей векторы миникольца. Клетки CD133 CAR-T и PD-1 проявляли значительную противоопухолевую активность против ГЦК in vitro и на моделях мышей с ксенотрансплантатами. Таким образом, CD133 CAR-T и PD-1 s-клетки могут быть терапевтически поддающейся стратегии воздействия на CD133-позитивные ОСК у пациентов мужского пола с распространенным ГЦК.

Наше исследование предлагает невирусную стратегию конструирования CAR-T-клеток, которые также могут секретировать ингибиторы блокады контрольных точек, на основе системы «Спящая красавица» из миникольцевых векторов, и выявило потенциальную пользу этой стратегии для пациентов мужского пола с развитой ГЦК и высокой экспрессией CD133 (средний показатель иммуногистохимии). > 2,284).

Отчеты экспертной оценки

Гепатоцеллюлярная карцинома (ГЦК) является наиболее распространенным первичным злокачественным новообразованием печени и третьей по значимости причиной смертности от рака во всем мире [1]. Несмотря на оценку многих химиотерапевтических препаратов и таргетных терапевтических агентов, единственными проверенными методами лечения запущенного заболевания являются сорафениб, регорафениб и ленватиниб, а общие преимущества выживаемости скромны [2]. Недавно два ингибитора белка программируемой клеточной смерти 1 (PD-1), пембролизумаб [3] и ниволумаб [4], были одобрены для лечения ГЦК у пациентов, у которых наблюдалось прогрессирование после приема сорафениба, но уровень ответа (приблизительно 20%) также был неудовлетворительно [5]. Таким образом, срочно необходима новая стратегия лечения, которая улучшит клинические преимущества ГЦК.

Рецидивы и метастазы являются частыми и ожидаемыми событиями после системной терапии у пациентов, получающих современные методы лечения распространенного ГЦК. Появляющиеся данные свидетельствуют о том, что большинство системных методов лечения могут только уменьшить первичную опухолевую нагрузку, поскольку раковые стволовые клетки (РСК) обладают внутренними механизмами сопротивления традиционной или новой терапии, а покоящиеся РСК ответственны за возникновение, рецидив и метастазирование опухоли [6, 7]. Наряду с наличием CD133-позитивных клеток, подобных стволовым клеткам ГЦК [8], все большее число исследований указывает на то, что экспрессия CD133 коррелирует с опухолями более высокой стадии и плохим прогнозом у пациентов с ГЦК [9, 10], что указывает на многообещающую стратегию лечения ГЦК. использование CD133 в качестве мишени для лечения ГЦК. Т-клетки, специфичные для химерного антигенного рецептора (CAR-T), нацеленные на CD133-положительные РСК, стали инструментом клинического лечения ГЦК (NCT02541370).

Иммунная терапия рака на основе CAR-T-клеток основана на стабильной интеграции трансгена в геном хозяина, так что введенное генетически модифицированное потомство может обеспечить долгосрочный терапевтический эффект. На сегодняшний день большинство методов CAR-T-клеточной терапии производятся с использованием традиционных вирусных векторных систем, которые широко и безопасно используются для встраивания трансгенов в Т-клетки, но иммуногенность, высокая стоимость рекомбинантных вирусных векторов клинического уровня и возможность инсерционного мутагенеза ограничивают их клиническое применение [11, 12]. Невирусные системы переноса генов являются привлекательной альтернативой современным методам производства CAR-T-клеток. Наиболее распространенной альтернативой вирусным векторам являются транспозоны. Сообщалось о различных системах на основе транспозонов для производства CAR-T-клеток, и эти системы обеспечивают более низкую иммуногенность, улучшенные профили безопасности и снижение затрат на производство CAR-T-клеток по GMP. Из доступных технологий, которые сейчас проходят клинические испытания, транспозонная система «Спящая красавица» (SB) претерпела наиболее быстрое развитие от создания до применения на людях [13]. Миникольца (МК) представляют собой сверхспиральные ДНК-векторы, которые представляют собой новую альтернативу плазмидам в качестве источников SB-транспозаз и транспозонов. По сравнению с обычными плазмидами, у ТК отсутствуют последовательности бактериального остова и гены устойчивости к антибиотикам, что приводит к более стабильным и более высоким уровням транзиторной экспрессии генов при трансфекции в клетки млекопитающих [14, 15].