Влияние вида-хозяина на состав микробиоты москитей Phlebotomus и Lutzomyia

Блог

ДомДом / Блог / Влияние вида-хозяина на состав микробиоты москитей Phlebotomus и Lutzomyia

Dec 21, 2023

Влияние вида-хозяина на состав микробиоты москитей Phlebotomus и Lutzomyia

Паразиты и векторы, том 16, Номер статьи: 310 (2023) Цитировать эту статью Подробности показателей Кровососущие флеботоминовые москиты являются переносчиками простейших паразитов Leishmania spp. Хотя

Паразиты и переносчики, том 16, Номер статьи: 310 (2023) Цитировать эту статью

Подробности о метриках

Кровососущие москиты-флеботомины являются переносчиками простейших паразитов Leishmania spp. Хотя кишечная микробиота участвует в широком спектре биологических и физиологических процессов и потенциально может изменять компетентность переносчиков, мало что известно о факторах, которые изменяют состав кишечной микробиоты москитных мух. В качестве ключевого шага к решению этой проблемы мы исследовали влияние вида-хозяина на бактериальный состав кишечника москитов Phlebotomus и Lutzomyia, выращенных в одинаковых условиях.

Амплификация гена бактериальной 16S рРНК и секвенирование Illumina MiSeq были использованы для характеристики общего бактериального состава трех выращенных в лаборатории москитов: Phlebotomus papatasi, Ph. duboscqi и Lutzomyia longipalpis.

Наши результаты показали, что личинки трех видов москитов содержали почти одни и те же микробы, но имели разную относительную численность. Взрослые Ph. papatasi и Ph. duboscqi выявили сходный состав микробиома, который отличался от состава взрослого Lu. лонгипальпис. Кроме того, мы показали, что Ph. papatasi и Ph. duboscqi являются хозяевами разных родов бактерий. Эксперимент был повторен дважды для повышения точности и повышения достоверности данных, и те же результаты были получены даже тогда, когда был выявлен различный состав микробиома у одного и того же вида, вероятно, из-за использования разных партий пищи личинок.

Настоящее исследование дает ключевую информацию о роли видов-хозяев в микробном составе кишечника различных видов москитов, выращиваемых в одних и тех же условиях, что может влиять на их восприимчивость к инфекции Leishmania.

Москиты-флеботомины (Diptera: Psychodidae) — это насекомые-гематофаги, которые питаются широким кругом хозяев и передают широкий спектр патогенов, вызывающих заболевания у людей и животных во всем мире. Среди более чем 1000 видов москитов, подтвержденных на сегодняшний день, только 10% являются известными или предполагаемыми переносчиками различных патогенов, включая арбовирусы и бактерии, но они общепризнаны как основные переносчики Leishmania, возбудителя лейшманиоза. забытая тропическая болезнь [1, 2].

Москиты живут группами и взаимодействуют с разнообразной микробиотой. Было продемонстрировано, что микробные симбионты влияют на ключевые аспекты приспособленности насекомых-хозяев [3,4,5,6]. Согласно предыдущему исследованию, мухи Lutzomyia longipalpis, получавшие рацион, содержащий фекалии кролика, чаще откладывали яйца, чем мухи, которых кормили стерилизованными фекалиями на стадии личинки [3]. Кроме того, у личинок, которых кормили стерильными фекалиями, наблюдались задержка вылупления и более низкие показатели выживаемости. Повторное введение элиминированных бактерий подтвердило первоначальные результаты, предполагая важность присутствия и специфичности бактерий для развития москитов. Бактерии, относящиеся к типу Proteobacteria, участвуют в питании насекомых-хозяев, фиксируя атмосферный азот [7]. И наоборот, хозяин также может в некоторой степени контролировать микробный состав, например, изменяя доступность питательных веществ посредством выбора диеты, метаболизма хозяина [8] или запуская иммунные факторы [9]. В этом контексте было продемонстрировано, что песок летит из тропических регионов, включая Лу. longipalpis, по-видимому, размножаются в почве, обогащенной разложившимися листьями и другим мусором, отдавая предпочтение основаниям деревьев. Кроме того, насекомые склонны вызывать иммунные реакции для поддержания сложного баланса между принятием и отвержением, тем самым поддерживая мирное сосуществование [9].

Естественная микробиота кишечника приобретается взрослыми москитами из различных источников, включая растения сахарного тростника и кровь от широкого круга хозяев или в результате повторной колонизации кишечника микробами, заглатываемыми наземно-живущими личиночными стадиями [3, 10,11,12]. ,13]. Большинство бактерий на личиночной стадии подвергаются биодеградации на стадии куколки, и микробный заряд сразу и значительно снижается после появления имаго [14, 15]. Самки москитов заражаются, проглатывая инфицированные клетки во время еды с кровью, и создают интерактивные отношения между микробным сообществом кишечника и паразитом, поскольку жизненный цикл развития Leishmania внутри переносчика москитов происходит исключительно в средней и задней кишке. наличие симбиотических бактерий [16, 17]. Бактериальное сообщество кишечника москитов может оказывать отрицательное или положительное влияние на развитие Leishmania в зависимости от вида бактерий [14, 17,18,19,20,21]. Дальнейшие исследования связи между бактериями, депонируемыми при укусах москитов, зараженных Leishmania, и клиническими исходами лейшманиоза показали, что кишечные микробы Lu. longipalpis, помимо Leishmania, проникают в кожу хозяина, вызывая инфильтрацию нейтрофилов и облегчая установку паразитов [22]. Согласно предыдущим исследованиям, особое внимание уделялось взаимодействиям, происходящим между микробным сообществом кишечника москитов и паразитами, а пул симбиотической микробиоты рассматривался как потенциальный кандидат для паратрансгенных или биологических подходов к борьбе с москитами. популяций [9, 11]. Предыдущие исследования показали, что различия в микробиоте кишечника насекомых могут быть выражены многими факторами, включая среду обитания хозяина, диету, стадию развития и филогению, и все они вносят вклад в состав микробиоты кишечника насекомых [23,24,25,26]. ,27,28]. Однако мало что известно о генетических факторах хозяина, которые изменяют состав микробиоты кишечника москитов, и, насколько нам известно, никаких исследований на этих насекомых в контролируемых условиях не проводилось.

5 years under the same laboratory conditions to minimize the potential influence of environmental factors and diet. In the laboratory, the sand flies were maintained in net cages (30 × 30 × 30 cm) at 26 ± 1 °C, 80–90% humidity, and a 12:12 (light: dark) photoperiod. The sand flies had access to a piece of cotton soaked in 30% sucrose solution. Non-blood-fed females were exposed to BALB/c mice (Japan SLC, Shizuoka, Japan) as the blood source. The blood-fed females were transferred individually to vials for oviposition. Eggs were placed in a 150-ml polystyrene container filled with 2 cm of plaster of Paris at its bottom (oviposition container) and were kept in the dark at 26 ± 1 °C, 80–90% humidity. Just before hatching, a very small amount of food was sprinkled on several spots near the eggs. Larval food was prepared by mixing fresh rabbit feces and rabbit chow in a 1:1 ratio, which was fermented at 26 °C for 4 weeks in a dark chamber, air dried, and ground to a powder [30]. Notably, two different food batches were prepared separately at two time different intervals, which may have caused change in bacterial communities./p> 5 years under the same conditions, and it was therefore thought that other variables, such as diet, temperature, and humidity, would not strongly affect the microbiome. Notably, females of Ph. papatasi and Ph. duboscqi are Old World species that are morphologically and genetically closely related, and both are known to be vectors of L. major [42]. In contrast, Lu. longipalpis is a New World species and natural vector of Leishmania infantum parasites. The separation between primitive Phlebotomus and Lutzomyia occurred approximately 200 million years ago [43]./p> 57% and 47% of the identified bacteria belonged to the Proteobacteria phylum in New and Old World sand fly species, respectively [47]. The distinct composition of the bacterial communities of Ph. papatasi and Ph. duboscqi was driven by two ASVs belonging to Rhizobiaceae and Yersiniaceae (genus Serratia). However, Lu. longipalpis was characterized by a specific bacterial structure dominated by Achromobacter, Tsukamurella, Staphylococcus, and Stenotrophomonas. Further studies are required to investigate the contributions of different bacterial taxa to the life traits of sand fly species, considering the contrasting evidence for the role of endosymbiotic bacteria in the infectivity and survival of Leishmania [14, 17]./p>